掃描電鏡（SEM）生物標本的制備是一個精細的過程，需要特別注意樣品的形態(tài)保持、干燥和導電性。以下簡介掃描電鏡生物標本制備的一般操作：

1. 取材：選擇適當?shù)纳锊牧?，如組織或細胞，并迅速將其切取。對于組織取材，切除組織要快，并迅速浸入預冷的固定液中，以防止細胞自溶。

2. 固定：使用適當?shù)墓潭ㄒ?，?%-4%的戊二醛（glutaraldehyde），在4°C下固定1-2小時。戊二醛能較好地保存微細結構，但對組織抗原有一定影響。

3. 漂洗：用磷酸鹽緩沖液（PBS）在4°C下漂洗0.4-2小時，中間需換液2次，以去除多余的固定液。

4. 脫水：使用一系列濃度遞增的乙醇或丙酮溶液進行脫水，如50%、70%、80%、90% 至 100%，每次脫水15分鐘至30分鐘。

5. 臨界點干燥：為了避免樣品在干燥過程中發(fā)生形變，可以使用臨界點干燥器進行干燥，這一步驟對于保持生物樣品的原始形態(tài)至關重要。

6. 導電處理：由于掃描電鏡需要在真空中進行觀察，樣品必須能夠導電以避免電荷積累?？梢允褂媒饘倌z帶、噴金或鍍鉑等方法使樣品表面導電。

7. 樣品安裝：將干燥和導電處理后的樣品安裝到SEM專用的樣品托上。確保樣品穩(wěn)固，避免在高真空環(huán)境下樣品移動或振動。

8. 觀察：在SEM中進行觀察前，可能需要對樣品進行額外的處理，如噴金增加導電性，或使用冷臺減少樣品在觀察過程中的荷電現(xiàn)象。

9. 顯微鏡操作：在SEM中，通過調節(jié)適當?shù)膮?shù)，如加速電壓、工作距離等，進行生物樣品的成像。
制備過程中，樣品的每個步驟都需小心操作，以保證最終成像的質量和準確性。此外，樣品制備的具體細節(jié)可能會根據(jù)樣品的類型和所需的特定信息有所不同。

文章出自：掃描電鏡實驗    想了解更多請關注：http://m.1122334.com.cn/